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二氧化碳培養箱的無汙染技術 

日期:2025-08-20 18:49
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摘要:

    二氧化碳培養箱是通過在培養箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環境,如穩定的溫度(37°C)、穩定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養的一種裝置。
  
  廣泛應用於細胞、組織培養和某些特殊微生物的培養,常見於細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產、培養雜交瘤細胞生產抗體、體外授精(IVF)、乾細胞、組織工程、**篩選等研究領域。在生物活體內,生物體有自身的**係統保護細胞或組織,但是在體外培養時,冇有任何保護自己的**屏障。
  
  對於二氧化碳培養箱的基本參數溫度、CO2和濕度,大多數培養箱都能滿足研究實驗的需要。然而,針對培養過程中麵臨的各種汙染源,各品牌二氧培養箱的控製方式和效果不儘相同,因此細胞體外培養中*大的威脅實際上是汙染問題。二氧化碳培養箱中的主要汙染源:**、**(黴菌和酵母菌)、病毒、支原體以及非同種細胞對於細胞來說,非常理想的培養環境同樣也適合這些汙染源的生存,培養箱本身是不會辨彆的,而細胞培養中大部分時間裡細胞都是被放置於培養箱內,因此箱體內能否抑菌或滅菌非常關鍵!
  
  **:**汙染後,培養基1-2天就會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯,應迅速將汙染細胞與其它細胞係隔離,滅菌後丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超淨台。病毒:由於病毒寄生生存,爆發後儘快和正常細胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,病毒汙染對操作者威脅較大;儘管病毒汙染的細胞不影響原代培養,但生產疫苗是不**的。潛在的病毒汙染是細胞大量生產和疫苗、乾擾素等生物製品製作中的難題。
  
  **(黴菌和酵母菌):**汙染後培養液不變渾濁,不象**汙染那麼容易被發現,**汙染是細胞培養中*常見的一種汙染;汙染後細胞生長的比較慢,目前冇有好的抑製方法,包括現在常用的兩性黴素,一旦汙染容易反複爆發,尤其孢子很難殺滅。
  
  支原體:支原體汙染細胞後,不會使細胞死亡且可以與細胞長期共存,培養基一般不發生渾濁,多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著,細微變化也可由於傳代、換液而緩解,外觀上給人以正常感覺,往往被大多數實驗者忽視,實則細胞已經受到多方麵潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑製細胞生長等。非同種細胞:即細胞交叉汙染,由於細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液冇有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞汙染。目前,世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所汙染,致使許多實驗宣告無效。